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關(guān)于ELISA試劑盒抗體免疫學(xué)反應(yīng)檢測介紹點擊次數(shù):1035 更新時間:2022-10-18

  ELISA試劑盒包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟,對操作的標(biāo)準(zhǔn)化極為有利。良好的elisa試劑盒板應(yīng)該是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之間和同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于配料的不同和制作工藝的差別,各種產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大。因此每一批號的聚苯乙烯制品在使用前須檢查其性能。常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA板各孔后,每孔內(nèi)加入適當(dāng)稀釋的酶標(biāo)抗人IgG抗體,保溫后洗滌,加底物顯色,終止酶反應(yīng)后分別測每孔溶液的吸光度。控制反應(yīng)條件,使各讀數(shù)在0.8左右。計算所有讀數(shù)的平均值。
 
  所有單個讀數(shù)與平均讀數(shù)之差應(yīng)小于10%.與聚苯乙烯類似的塑料為聚氯乙烯。作為ELISA固相載體,聚氯乙烯板的特點為質(zhì)軟板薄,可切割,價廉、但光潔度不如聚苯乙烯板。聚氯乙烯對蛋白質(zhì)的吸附性能比聚苯乙烯高,但空白值有時也略高。免疫熒光技術(shù)雖已廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)的研究與診斷,但是熒光抗體染色標(biāo)本不能長期保存,對組織細(xì)胞的細(xì)微結(jié)構(gòu)分辨不清,免疫酶技術(shù)則能克服上述不足,標(biāo)記免疫酶技術(shù)的敏感性更優(yōu)于免疫熒光法,ELISA試劑盒對石蠟切片標(biāo)本尤為適用,為免疫病理研究開辟了一條新途徑,酶顯色產(chǎn)物具有較高的電子密度,經(jīng)過適當(dāng)處理還可以進(jìn)行免疫電鏡觀察,免疫酶組化技術(shù)分為酶標(biāo)記法與非標(biāo)記抗體技術(shù),前者是將酶通過交聯(lián)劑結(jié)合在抗體分子上,形成酶標(biāo)記抗體。后者是將酶作為抗原與相應(yīng)的特異性抗體連接進(jìn)行的免疫反應(yīng),稱為非標(biāo)記抗體酶技術(shù)。
 
  免疫酶技術(shù)利用酶催化底物反應(yīng)的生物放大作用,提高特異性抗原-敏感性的一種標(biāo)記免疫技術(shù)。該技術(shù)所用的酶要求純度高、催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高、專一性強、性質(zhì)穩(wěn)定、來源豐富、價格不貴、ELISA試劑盒制備成的酶標(biāo)抗體或抗原性質(zhì)穩(wěn)定,繼續(xù)保留著它的活性部分和催化能力。在受檢標(biāo)本中不存在與標(biāo)記酶相同的酶。另外它的相應(yīng)底物應(yīng)易于制備和保存,價格低廉,有色產(chǎn)物易于測定,光吸收高。
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